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植物乙醛酸測(cè)定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2024-06-11 | 281 次瀏覽 | 分享到:

乙醛酸又稱為甲酰甲酸,是最簡(jiǎn)單的醛酸。這種酸往往存在植物的還沒成熟的果實(shí)、鮮嫩綠葉和甜菜中。微溶于乙醇、乙醚、苯,可溶于水。它具有酸和醛的特性,就可以和亞硫酸氫鈉或氫氰酸加成,和羥胺或苯肼作用生產(chǎn)腙,能發(fā)生銀鏡反應(yīng),也能生成羧酸鹽和酯類。乙醛酸可以用作清漆原料、香料、醫(yī)藥、染料以及化學(xué)品的中間體。



檢測(cè)植物體內(nèi)的乙醛酸含量,目前比較常見的方法有高效液相色譜(HPLC)法、氣相色譜(GC)法,GC-MS等。


HPLC的方法用的也比較多,采用標(biāo)準(zhǔn)的操作步驟和流程,就可以計(jì)算出樣品中的乙醛酸含量。這里說一下氣相色譜檢測(cè)法,氣相色譜要用的熟練,對(duì)樣品和方法要足夠的了解。需要有完全獨(dú)立操作氣相色譜儀的技術(shù)工程師,需要有高精密的氣相色譜儀,色譜柱,進(jìn)樣器,檢測(cè)器。這里的檢測(cè)器,可以用到質(zhì)譜儀,分辨率更高,可以更準(zhǔn)確的測(cè)定樣品中的乙醛酸含量。氣相最重要的條件,就是需要有氮?dú)?。同時(shí),要用到乙醇和乙醛酸。



待測(cè)的樣品需要進(jìn)行處理,并用乙酸乙酯溶解。當(dāng)溶液中有目標(biāo)化合物-乙醛酸的時(shí)候,注入到氣相色譜,還需要有物質(zhì)來引領(lǐng),就是內(nèi)標(biāo)物質(zhì)(如5-氯鄰苯二甲酸)。使用氣相色譜檢測(cè)化合物,什么才是最重要的呢?就是條件設(shè)置。如果條件設(shè)置有一個(gè)地方不恰當(dāng),就可能達(dá)不到理想的分離或檢測(cè)效果。氣相色譜在檢測(cè)的時(shí)候,條件是多個(gè)的,而且要通力配合的。


以下的可以作為參考,如果要做檢測(cè),需要根據(jù)實(shí)際情況來選擇使用,不要生搬硬套。


色譜柱:DB-5(30m×0.32mm,0.25μm);

氫氣流量:1.0mL/min;

進(jìn)樣模式:splitless進(jìn)樣,溫度280℃;

熱程序:初始溫度為50℃,保持1min,溫升速率30℃/min,最終溫度220℃,保持5min;

檢測(cè)器:質(zhì)譜檢測(cè)器(MS)。


利用乙醛酸和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的質(zhì)譜峰面積之比,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)各樣品進(jìn)行質(zhì)譜峰強(qiáng)度的積分,計(jì)算出待測(cè)樣品乙醛酸的含量。


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