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芍藥色素含量測(cè)定方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-06-03 | 32 次瀏覽 | 分享到:
芍藥色素是一種重要的花青苷類(lèi)色素,其主要成分為芍藥皂苷和芍藥苷等。它主要來(lái)源于芍藥的花瓣,在酸性條件下呈紅色,在堿性條件下呈藍(lán)紫色。它微溶于水,卻溶于乙醇,丙酮,乙酸乙酯等,熱穩(wěn)定性差。具有抗炎,抗氧化,抗凝血等功能,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品等多個(gè)領(lǐng)域。

芍藥色素是一種重要的花青苷類(lèi)色素,其主要成分為芍藥皂苷和芍藥苷等。它主要來(lái)源于芍藥的花瓣,在酸性條件下呈紅色,在堿性條件下呈藍(lán)紫色。它微溶于水,卻溶于乙醇,丙酮,乙酸乙酯等,熱穩(wěn)定性差。具有抗炎,抗氧化,抗凝血等功能,廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化妝品等多個(gè)領(lǐng)域。



常用的檢測(cè)方法,包括高效液相色譜(HPLC)、液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)等。以HPLC為例,簡(jiǎn)單的介紹一下檢測(cè)過(guò)程。


1.樣品處理


將植物樣本進(jìn)行粉碎,研磨,過(guò)篩,然后加入甲醇等有機(jī)溶劑,超聲,離心處理,膜過(guò)濾等步驟。具體參考相關(guān)的操作文獻(xiàn)或?qū)嶒?yàn)報(bào)告。



2.色譜條件


根據(jù)芍藥色素的物理和化學(xué)性質(zhì),選擇C18的色譜柱,長(zhǎng)度250mm,內(nèi)徑4.6mm,粒徑5um,柱溫25℃,乙腈和水為流動(dòng)相(11:89),等度洗脫,紫外檢測(cè)器,波長(zhǎng)230nm,進(jìn)樣量10uL。根據(jù)實(shí)際出峰的情況,進(jìn)行參數(shù)的調(diào)整,盡可能的達(dá)到提取并分離出來(lái),有效的顯示在色譜峰上。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)


精密的稱(chēng)量適量的芍藥色素標(biāo)準(zhǔn)品,用甲醇進(jìn)行溶解,制成1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)母液。然后,用甲醇進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)@個(gè)倍數(shù)要自己掌握,可以用2倍,也可以用5倍,盡可能的覆蓋到樣本溶液可能得濃度范圍。同時(shí),標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度范圍要在檢測(cè)限的范圍內(nèi),確保測(cè)出來(lái)數(shù)據(jù)的可靠性。常規(guī)下,是稀釋成5-7個(gè)濃度點(diǎn)。通過(guò)確定好的色譜條件,測(cè)出對(duì)應(yīng)的色譜峰,在軟件上記錄保留時(shí)間,對(duì)峰面積進(jìn)行積分處理。在表格中,通過(guò)函數(shù)的方式,將峰面積和標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)應(yīng)起來(lái),擬合成標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)1>R2>0.999。有的時(shí)候,還要看重復(fù)性,精密度,加標(biāo)回收率等。


4.含量計(jì)算


采用同樣的方法,將樣品溶液進(jìn)樣到HPLC中,等出峰之后通過(guò)比對(duì)保留時(shí)間,可以識(shí)別出目標(biāo)化合物的峰。對(duì)峰面積進(jìn)行積分,代入到回歸方程,是可以計(jì)算出樣品溶液中的芍藥色素含量。


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