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三七皂苷R1含量測(cè)定方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-06-12 | 30 次瀏覽 | 分享到:
三七皂苷R1主要來(lái)源于中藥材三七的干燥根莖,屬于達(dá)瑪烷型的四環(huán)三萜類皂苷化合物,分子結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜。在藥理學(xué)研究方法,具有保護(hù)心血管,抗氧化,抗炎,調(diào)節(jié)免疫,保護(hù)神經(jīng)等作用?;瘜W(xué)式為C47H80O18,分子量933.13,溶解于甲醇、乙醇、DMSO和熱水,不溶于乙醚、氯仿和苯等。

三七皂苷R1主要來(lái)源于中藥材三七的干燥根莖,屬于達(dá)瑪烷型的四環(huán)三萜類皂苷化合物,分子結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜。在藥理學(xué)研究方法,具有保護(hù)心血管,抗氧化,抗炎,調(diào)節(jié)免疫,保護(hù)神經(jīng)等作用?;瘜W(xué)式為C47H80O18,分子量933.13,溶解于甲醇、乙醇、DMSO和熱水,不溶于乙醚、氯仿和苯等。



檢測(cè)方法:高效液相色譜(HPLC),液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)等。


1.樣品處理


稱取樣品粉末(過(guò)四號(hào)篩)0.6g,并加入50mL甲醇到具塞容量瓶中。稱定重量,放置過(guò)夜,置80℃水浴上保持微沸2小時(shí),放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,0.22um膜過(guò)濾,待測(cè)。


2.色譜條件


C18色譜柱,250mm長(zhǎng),4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,柱溫25℃。紫外檢測(cè)器,波長(zhǎng)203nm。進(jìn)樣量10-20uL,流速1ml/min。以乙腈和水為流動(dòng)相,梯度洗脫。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


取三七皂苷R1的標(biāo)準(zhǔn)品適量,精密稱量,并加入70%甲醇溶解并稀釋成2.5mg/ml。梯度稀釋5-7個(gè)點(diǎn),有的時(shí)候是成倍的,比如2倍或5倍,盡可能覆蓋到樣品溶液的范圍。最低點(diǎn)一般是定量限,通過(guò)信噪比的10倍可以得到。進(jìn)樣到HPLC,測(cè)定出各個(gè)濃度點(diǎn)的色譜峰。記錄色譜峰的保留時(shí)間,并對(duì)標(biāo)品的色譜峰面積進(jìn)行積分處理。對(duì)應(yīng)峰的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,可擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程。


4.含量計(jì)算


將樣品溶液進(jìn)樣到HPLC中,根據(jù)保留時(shí)間,找到三七皂苷R1的色譜峰。對(duì)這個(gè)色譜峰的面積進(jìn)行積分處理,代入到回歸方程,可計(jì)算出樣品溶液中的三七皂苷R1含量。


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