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蒼術素含量測定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-06-20 | 37 次瀏覽 | 分享到:
蒼術素是一種重要的甾體化合物,主要來源于菊科植物茅蒼術或北蒼術的干燥根莖。分子式為C13H10O,分子量:182.2,可溶于甲醇、乙醇等有機溶劑。蒼術素具有降血糖、利尿、促進胃排空、抗炎等生理活性。

蒼術素是一種重要的甾體化合物,主要來源于菊科植物茅蒼術或北蒼術的干燥根莖。分子式為C13H10O,分子量:182.2,可溶于甲醇、乙醇等有機溶劑。蒼術素具有降血糖、利尿、促進胃排空、抗炎等生理活性。


檢測方法,包括高效液相色譜(HPLC),氣相色譜(GC)等。


1.HPLC


樣品處理:將樣本加入液氮,研磨成粉末的狀態(tài)。精確稱量大于0.3g放入到15ml的離心管中,加入5ml的甲醇,充分振蕩1min。在室溫的條件下,超聲30min。結(jié)束后,用4000r/min的離心機進行離心10min。轉(zhuǎn)移上清液到新的離心管中,向殘渣中加入5ml的甲醇,重復一次合并上清并定容10mL。上清液0.22um膜過濾,待測。


色譜條件:C18的色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑;柱溫25-30℃,VWD檢測器,波長200nm;以甲醇和水為流動相,等度洗脫。流速1ml/min,進樣量20uL。


標準曲線:精密稱取一定量各個標準品于5mL棕色容量瓶中,然后加入適量甲醇超聲溶解后用甲醇定容至刻度線,搖勻、使之成為2mg/mL的單標儲備液,-20℃保存。梯度稀釋6個濃度點,盡可能的覆蓋到樣本溶液的濃度范圍。依次進樣到HPLC,測出色譜峰,記錄保留時間,對標準品的峰面積進行積分,在表格中擬合出標準曲線,得到回歸方程。


樣品測定:對樣品的測定方法,類似于標準品。進樣到HPLC中,出現(xiàn)的峰不一定有標準峰那么漂亮。因為樣本中化合物的種類和含量是不確定的,但要確保方法是科學的、準確的、有效的。對測出來的色譜峰面積進行積分,并代入到回歸方程,計算出樣品溶液中的蒼術素含量。


2.GC


采用氫火焰離子檢測器(FID),適當?shù)拿毠苌V柱,柱溫:150℃,進樣器溫度:280℃,氮氣流速:30ml/min,氫氣流速:30ml/min,程序升溫。


對照品溶液的配制分別精密稱取蒼術素適量,加乙醚分別制成每毫升約含0.01mg的溶液,作為對照品溶液。梯度稀釋6個濃度點,盡可能覆蓋到樣品溶液的濃度范圍。進樣到氣相色譜,根據(jù)色譜峰面積和對應濃度,繪制標準曲線,得到回歸方程。


樣品溶液的制備精密稱取樣品粉末(過40目篩)100mg,置于10ml具塞試管中,加乙醚5.0ml,室溫超聲波提取10min,室溫靜置,上清液作為樣品溶液。


測定精密吸取樣品溶液及對照品溶液各2μl,進樣測定出色譜圖。色譜峰面積,代入到回歸方程,得到樣品溶液中的蒼術素含量。


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